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黃曲霉毒素免疫親和柱重要操作程序明細(xì)
點(diǎn)擊次數(shù):2192 更新時(shí)間:2019-01-15
 黃曲霉毒素免疫親和柱系列產(chǎn)品包括以下特點(diǎn):
采用高特異性和高親和力的的單克隆抗體。
柱容量高,有效提高純化效率。
達(dá)到真菌毒素檢測(cè)的國(guó)內(nèi)外*。
良好的穩(wěn)定性和可靠性,回收率達(dá)到90-95%。
 
操作程序
樣品準(zhǔn)備:
以下只是對(duì)一般樣品的操作過(guò)程。具體到某些樣品,可以在對(duì)操作過(guò)程進(jìn)行調(diào)整。
適用樣品:玉米,小麥,燕麥,黑麥和大麥,奶制品。
 
樣品取樣:
真菌毒素分析的誤差來(lái)源是樣品的收集和取樣過(guò)程,所以要保證樣品收集和取樣具有代表性。
樣品提取:
步:稱取粉碎后的樣品,加入提取溶液;
第二步:用高速均質(zhì)機(jī)攪拌,提??;
第三步:用漏斗過(guò)濾樣品溶液;
 

樣品過(guò)柱純化
稱取粉碎后的樣品,加入提取溶液;
1.純化柱準(zhǔn)備:取出黃曲霉m1免疫親和層析柱, 恢復(fù)至室溫,將上方塞子取出斜剪斷,再插回親和柱上,連接儲(chǔ)樣管和收集管;
2.加樣:加入10ml樣品液過(guò)柱,去掉親和柱下方堵頭,調(diào)節(jié)開(kāi)關(guān),流速為1ml/min左右。
3.洗滌:液體*排凈后,加入5ml10%甲醇水2次,流速為3ml/min左右。(如有需要,可重復(fù)洗滌幾次)
4.洗脫:液體排凈后,更換收集管,加入1.5-3ml甲醇,孵育2min,流速為1ml/min左右。
注:收集管中的洗脫液即為純化后的樣品,可直接用ELISA,熒光和液相等方法進(jìn)行檢測(cè)。
 
可重復(fù)性(CV%):
純化后直接用于ELISA 法,液相色譜法,熒光光度法等。
穩(wěn)定性:18個(gè)月
可以用于復(fù)雜樣品檢測(cè),包括食品、飼料、調(diào)味品等多種復(fù)雜基質(zhì)。
可用于黃曲霉毒素B1B2G1G2M1M2,嘔吐毒素,伏馬毒素,赭曲霉毒素和玉米赤霉烯酮的檢測(cè)。
 
產(chǎn)品功能:黃曲霉毒素免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的黃曲霉毒素m1,從而對(duì)黃曲霉毒素m1樣品起到非常針對(duì)性的純化作用,過(guò)柱凈化后的樣品液可直接用于液相進(jìn)行黃曲霉毒素m1含量的檢測(cè)。親和層析柱與HPLC配合使用可達(dá)到快速測(cè)定的目的,以改善信噪比,可提高檢測(cè)方法的準(zhǔn)確度。
 
反應(yīng)原理:黃曲霉毒素免疫親和柱的測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),黃曲霉毒素m1單克隆抗體連接在柱內(nèi)凝膠上,樣品中的黃曲霉毒素m1經(jīng)過(guò)提取、過(guò)濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢的通過(guò)黃曲霉毒素B1免疫親和層析柱,在免疫親和柱內(nèi),毒素與抗體結(jié)合,之后洗滌免疫親和柱除去沒(méi)有被結(jié)合的其他物質(zhì)。用甲醇洗脫黃曲霉毒素m1,然后注入到分析儀器中用于檢測(cè)。