貝類毒素免疫親和柱在技術(shù)原理上有哪些特殊的地方?
點(diǎn)擊次數(shù):1731 更新時(shí)間:2018-12-24
貝類毒素免疫親和柱是由有毒赤潮藻類鰭藻屬和原甲藻屬的一些種類產(chǎn)生的脂溶性多環(huán)醚類生物活性物質(zhì)。腹瀉性貝毒可在貝等濾食性動(dòng)物體內(nèi)富集,危害食用者健康。腹瀉性貝毒在沿岸海域均有分布,是世界范圍內(nèi)具有嚴(yán)重威脅的赤潮藻毒素之一。
貝類毒素免疫親和柱是采用環(huán)氧氯丙烷活化法活化的瓊脂糖凝膠作為載體,然后將基因重組蛋白G偶聯(lián)到載體上,得到了蛋白G?sepharose,再將腹瀉性貝類毒素抗體連接到蛋白G?sepharose上,得到了抗體—蛋白G—sepharose,再用交聯(lián)劑進(jìn)行交聯(lián),得到了抗體—蛋白G—sepharose填料,后將抗體—蛋白G—sepharose填料裝柱后形成了高純度和親和力的腹瀉性貝類毒素免疫親和柱,充分利用基因重組蛋白G與腹瀉性貝類毒素抗體特異性結(jié)合的特點(diǎn),腹瀉性貝類毒素抗體的Fab片段暴露在外,大幅度提高了基因重組蛋白G的抗體結(jié)合能力、腹瀉性貝類毒素的捕捉能力和腹瀉性貝類毒素的純化效率。
貝類毒素免疫親和柱
是利用抗原、抗體之間高度特異性結(jié)合對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行凈化富集的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù),預(yù)置在柱體內(nèi)的特異性抗體,選擇性結(jié)合樣品中的待檢物,雜質(zhì)不被結(jié)合,流出柱外,柱上結(jié)合的目標(biāo)物再備洗脫液洗脫,從而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物的凈化和濃縮。
貝類毒素免疫親和柱特點(diǎn):
1、采用自主研發(fā)的高特異性和高親和力的單克隆抗體。
2、穩(wěn)定性好,回收率高,回收率≥90%。
3、基質(zhì)采用GE凝膠。
4、重復(fù)性好(CV%)<5%。
5、柱容量高,有效提高純化效率。
6、適用于HPLC或LC-MS檢測(cè)。
7、符合歐盟*要求。